Вирус иммунодефицита человека состоит из ряда белков (антигенов), к каждому из которых у инфицированного пациента вырабатываются специфические антитела. В отличие от тестов, выполняемых на первых этапах (ИФА, ИХЛА, экспресс-тесты), иммуноблот может определять к каким конкретно антигенам ВИЧ у пациента есть антитела.
Согласно критериям Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ), положительный результат может быть установлен при обнаружении антител как минимум к двум из трех поверхностных белков вируса (gp). Поэтому использование иммуноблота сводит к минимум вероятность ложноположительных результатов.
Рис. 1. Пример иммуноблота
gp160, gp120, gp41, p66, p24, p17 –белки вируса. Появление на тест-полоске темной поперечной черты свидетельствует о присутствии в организме пациента антител к данному белку.Пример иммуноблота
Существует два типа иммуноблота. Первый, так называемый Вестерн-блот, производится из белков настоящих, но предварительно разрушенных вирусов, выращиваемых в культуре клеток. Преимуществом Вестерн-блота является то, что в нем присутствуют все белки ВИЧ, и мы можем увидеть полную картину, происходящего в организме пациента процесса генерации специфических антител. Однако использование дорогостоящей культуры соответственно сказывается на цене данного теста. Второй тип иммуноблота - линейный иммунный тест, был разработан с целью удешевления подтверждающего анализа. В линейных иммунных тестах используются рекомбинантные (искусственно созданные) белки. Поскольку в тестах данного типаотсутствует ряд белков ВИЧ, мы получаем фрагментарную картину. Так, например в линейных иммунных тестах отсутствует белок gp160 - один из трех поверхностных белков, на основании которых выносится окончательное решение, что делает данный тест менее информативным. Поэтому Вестерн-блот остается на сегодня «золотым стандартом» для подтверждения диагноза ВИЧ-инфекции.
3.Насколько надежны отрицательные результаты иммуноблота?
В силу недостаточной чувствительности (по сравнению с ИФА, ИХЛА или экспресс-тестами), к отрицательным результатам иммуноблота необходимо относится с осторожностью. Поэтому при получении отрицательного или неопределенного результата иммуноблота Центры СПИД предписывают пациенту пройти повторное обследование через две недели. Как правило, этого периода достаточно, чтобы организм пациента выработал в достаточном количестве антитела к основным белкам вируса. Однако в некоторых случаях этот процесс может растянуться на несколько месяцев, поэтому пациента могут пригласить пройти обследование еще несколько раз, вплоть до окончательного установления или исключения диагноза ВИЧ-инфекции.
4.Как обеспечивается безопасность донорской крови?
Скрининг доноров крови на ВИЧ (т.е. обязательное обследование каждой кроводачи, каждого донора) осуществляется не региональными СПИД, а центрами крови. При этом используются методы ИХЛА/ИФА четвертого поколения, позволяющие одновременно выявлять вирусный антиген и антитела к ВИЧ. Кроме того, образцы крови проходят обследование с использованием метода полимеразной цепной реакции (на Рис. 2 обозначена как NAT – nucleicacidamplificationtechnology, англ.), позволяющим обнаруживать РНК ВИЧ уже на 10 день после инфицирования. До этого момента ВИЧ-инфекция не определяется никакими тестами.
Рис. 2. Выявление ВИЧ-инфекции с помощью тестов различных форматов и поколений в процессе естественного течения инфекции.Выявление ВИЧ-инфекции с помощью тестов
При получении положительного результата любого из тестов, потенциально инфицированная донорская кровь подвергается уничтожению, а сам донор отстраняется от возможности сдавать кровь в дальнейшем. При этом диагноз ВИЧ-инфекции донору без проведения подтверждающих исследований не ставится. Для постановки окончательного диагноза образец крови донора направляется в РЦ СПИД для проведения дальнейших исследований согласно утвержденного алгоритма тестировния на ВИЧ инфекцию.
5.Как в Казахстане осуществляется диагностика на ВИЧ-2?
Согласно имеющимся эпидемиологическим данным на территории СНГ на сегодня не зарегистрировано ни одного случая ВИЧ-2 инфекции. Тем не менее, во всех лабораториях региональных центров СПИД Казахстана и центров крови используются тест-системы, способные одновременно выявлять как ВИЧ-1, так ВИЧ-2 инфекцию. Кроме того, большая схожесть строения вирусов первого и второго типа обеспечивает перекрестную реакцию в иммуноблоте на стадии подтверждения. При подозрении на ВИЧ-2 инфекцию в распоряжении лаборатории РЦ СПИД имеется соответствующий иммуноблот для выявления специфически антител к вирусу иммунодефицита человека второго типа.
6.Сколько стоит тест на ВИЧ?
Согласно тарифов на медицинские услуги в рамках гарантированного объема бесплатной медицинской помощи, утвержденных приказом Министерства здравоохранения РК, стоимость исследования на ВИЧ составляет 1413,99 тенге.
В целях широкого доступа населения к тестированию на ВИЧ-инфекцию, медицинские организации всех форм собственности могут проводить первый этап лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. При этом Министерством здравоохранения будут предусмотрены квалификационные требования и обязательность предоставления статистической отчетности.